隨著生活水平的提高，各種各樣的桶裝水走進(jìn)了人們的生活，除了關(guān)心桶裝水的衛(wèi)生外，大多數(shù)市民所關(guān)心的就是桶裝水的保質(zhì)期了，桶裝水的保質(zhì)期是多久，多長時(shí)間內(nèi)飲用較佳等等，為了解決市民的疑問，近期，記者從市場(chǎng)上選購了幾種不同類型的桶裝水進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，內(nèi)容如下：

一、實(shí)驗(yàn)步驟

1 . 苗落總數(shù): 以無菌操作方法用滅菌吸管吸取充分混勻的水樣, 注入滅菌平皿中, 傾注約1 5mL 已融化并冷卻到4 5 ℃ 左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基, 并立即旋搖平皿, 使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。每次檢驗(yàn)時(shí)做平行接種, 同時(shí)另用一個(gè)平皿只傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。待冷卻凝固后, 翻轉(zhuǎn)平皿, 使底面向上, 置于36 士1 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)(礦泉水培養(yǎng)24 h 、純凈水培養(yǎng)4 8 h) , 進(jìn)行菌落計(jì)數(shù), 即為水樣1mL 中的菌落總數(shù)。

2 . 大腸苗群(多替發(fā)嶺法) :

(l) 用10m L 滅菌吸管向5 支盛有10 mL 雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)液的試管中(內(nèi)有倒管) 接種10 印L 水樣。置于3 6 士1 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2弓h(huán), 觀察每支試管的產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況, 如沒有產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況發(fā)生, 則認(rèn)為推測(cè)性檢驗(yàn)陰性, 實(shí)驗(yàn)報(bào)告為大腸菌群陰性。如有產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況發(fā)生, 則認(rèn)為推測(cè)性檢驗(yàn)陽性, 同時(shí)進(jìn)行證實(shí)性檢驗(yàn)和革蘭氏染色。

(2 ) 自產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸的發(fā)酵管中取一接種外獵喬敵, 按柳仕伊紅夫監(jiān)壞脂半取上, 置于3 6 士1 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18 一24 h , 然后取出, 觀察菌落形態(tài), 挑選可疑菌落1 一2 個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢, 同時(shí)接種乳糖膽鹽發(fā)酵管, 置于36 士1 ℃ 恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h , 觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌, 即可報(bào)告大腸菌群陽性。相反, 大腸菌群陰性。(礦泉水用亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液, 置于36 士l℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)4 8h , 觀察試管中的產(chǎn)氣情況, 如有氣體產(chǎn)生, 就可確定為大腸菌群陽性。如無氣體產(chǎn)生, 則為大腸菌群陰性)。

3 . 效病苗: (1) 沙門氏藺

a . 增菌吸取水樣25 m L, 加入滅菌生理鹽水2 s m L , 做成檢樣勻液。吸取2 5 m L , 接種于1 0 0m L 氯化鎂孔雀綠增菌液或四硫酸鈉煌綠增菌液內(nèi), 于4 2 ℃ 培養(yǎng)2 4 h 。同時(shí), 另取2 5 m L , 接種于1OOIu L 亞硒酸鹽朧氨酸增菌液內(nèi), 于36 士l oC 培養(yǎng)18 一2 4h 。

b . 分離取增菌液1 環(huán), 劃線接種于一個(gè)亞硫酸瓊脂平板和一個(gè)D HL 瓊脂平板。兩種增菌液可同時(shí)劃線接種在同一個(gè)平板上。于36 士l℃ 分別培養(yǎng)18 ~ 24 h , 觀察各個(gè)平板上菌落的生長情況和特征。

c . 生化試驗(yàn)自選擇性平板上直接挑取數(shù)個(gè)可疑菌落, 分別接種三糖鐵瓊脂內(nèi), 觀察菌落生長情況。

a . 增菌吸取水樣25 m L , 加入裝有22 5GNmL 增菌液的so mL 廣口瓶?jī)?nèi), 于36 士1 ℃ 培養(yǎng)6 一8h 。(培養(yǎng)時(shí)間視細(xì)菌生長情況而定, 當(dāng)培養(yǎng)液出現(xiàn)輕微渾濁時(shí)即應(yīng)中止培養(yǎng)。

b . 分離和初步生化試驗(yàn)取增菌液1 環(huán), 劃線接種于HE 平板或S 瓊脂平板一個(gè); 另取一環(huán), 劃線接種于麥康凱平板或伊紅美藍(lán)瓊脂平板一個(gè), 于36 士1 ℃ 培養(yǎng)18 ~ 24h 。挑取平板上的可疑菌落, 接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各1 管(一般應(yīng)多挑幾個(gè)菌落, 以防遺漏), 經(jīng)36 士1℃培養(yǎng)18 一24h , 分別觀察結(jié)果。

4 . 零苗: 以無菌操作吸取水樣 2 5禮, 放入含有2 25 mL 滅菌水的玻塞三角瓶中, 振搖30 m in , 即為1 : 10 稀釋液。用滅菌吸管吸取1 : 10 稀釋液1 0m L, 注入試管中, 另用帶橡皮乳頭的lmL 滅菌吸管反復(fù)吸取50 次, 使霉菌抱子充分散開。然后取lmL I : 10 稀釋液注入含有9毗滅菌水的試管中, 另換一支1呱滅菌血管吹吸5 次, 此液為1 : 10 稀釋液。按上述操作順序做10 倍遞增稀釋液, 每稀釋一次, 換用一支1毗滅菌吸管, 根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì), 選擇3 個(gè)合適的稀釋度, 分別在做10 倍稀釋的同時(shí), 吸取lmL 稀釋液于滅菌平皿中, 每個(gè)稀釋度做2 個(gè)平皿, 然后將冷卻至4 5 ℃左右的虎紅培養(yǎng)基注入平皿中, 待瓊脂凝固后, 倒置于25 ~ 28 oC, 恒溫培養(yǎng)箱中, 3 天后開始觀察, 共培養(yǎng)觀察5 天。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果與數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

經(jīng)過三個(gè)月時(shí)間對(duì)飲用桶裝水保質(zhì)期限的檢測(cè), 收集了5 6 0 組相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù), 統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下圖:

1 . 實(shí)驗(yàn)1 (未開封狀態(tài))

備注不合格情況: 菌落總數(shù)很標(biāo)20 批次, 霉菌很標(biāo)3批次, 大腸菌群很標(biāo)3 批次。機(jī)后的桶裝水, 常溫水樣的微生物污染情況。在此次實(shí)驗(yàn)中礦泉水在未開封狀態(tài)下合格率能達(dá)到97. 2%, 但在正常飲用下只能達(dá)到57 . 4%。即使是經(jīng)過檢驗(yàn)合格的桶裝水, 裝桶后立即采樣(零小時(shí)) 微生物即顯著很標(biāo), 1 0桶水中就有7桶水的菌落總數(shù)很標(biāo), 合格率僅為30 %。說明飲水機(jī)是桶裝水二次污染的肯定原因。據(jù)分析: 從統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)可以看出: a 未開封狀態(tài)下(實(shí)驗(yàn)時(shí)間三個(gè)月) 礦泉水的水質(zhì)比較穩(wěn)定, 合格率為9 7 . 2 %; 而純凈水的水質(zhì)較差, 合格率僅為4 4 . 4 % 。其中不合格項(xiàng)目絕大部分出現(xiàn)在純凈水中: 菌落總數(shù)很標(biāo)6 組, 占1 6 . 7 %, 霉菌很標(biāo)17 組, 占4 7 . 2 %。b . 正常飲用狀態(tài)下(實(shí)驗(yàn)時(shí)間一個(gè)月) 水質(zhì)變化情況較復(fù)雜。以剛消毒的飲水機(jī)的冷水閥放出的水為原始值進(jìn)行檢驗(yàn), 10 桶水中就有7 桶水的菌落總數(shù)很標(biāo), 占70% 。然后每隔4 天、3 天進(jìn)行抽樣檢測(cè), 發(fā)現(xiàn)菌落總數(shù)很標(biāo)的有20 組, 占29 . 4% ; 大腸菌群很標(biāo)的有3 組, 占4 . 4% , 霉菌很標(biāo)的有3 組, 占4. 4% 。c . 結(jié)合我所幾年來監(jiān)督檢驗(yàn)的情況來看, 桶裝水不合格的原因有以下三個(gè)方面: 一是菌落總數(shù)很標(biāo); 二是電導(dǎo)率很標(biāo); 三是個(gè)別樣品存在亞硝酸鹽很標(biāo)的情況。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)論與討論

結(jié)奮1 : 純凈水不透壹飲用從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知, 純凈水在未機(jī)的二次污染主要來自于儲(chǔ)水膽飲水、水道、聰明座、7.5升水桶等。這些部位如果長期不清洗和消毒, 就會(huì)沉積污垢, 成為細(xì)菌和病毒滋生的溫床。國內(nèi)其他研究實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn), 經(jīng)飲水機(jī)后的桶裝水, 常溫水樣的微生物污染率隨著時(shí)間推移而上升, 除儲(chǔ)水膽、水道、聰明座內(nèi)的細(xì)菌和病毒隨時(shí)間而繁殖外, 另一重要因素是飲水機(jī)每裝小于30 0n止的保質(zhì)期不少于12 個(gè)月, 包裝大于3000 m L 的保質(zhì)期不少于1個(gè)月, 這是針對(duì)在未開封狀態(tài)下而言。而在實(shí)際使用過程中, 5 加侖桶裝水18 . 9 升, 一家三口一般情況下使用7 天左右。在本次實(shí)驗(yàn)過程中, 編號(hào)為2003一B6 和2003- B7 的樣品因平時(shí)用水量小, 在第1 、2 、3 、4 次實(shí)驗(yàn)時(shí), 大腸菌群出現(xiàn)產(chǎn)酸現(xiàn)象, 而第5 次實(shí)驗(yàn)前一天, 因故大量用水后, 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)生明顯變化: 大腸菌群未出現(xiàn)產(chǎn)酸現(xiàn)象, 說明桶裝水如果用水量小而使飲用期過長也會(huì)造成污染。

另有資料報(bào)道, 研究人員對(duì)消毒后的飲水機(jī)進(jìn)行桶裝礦泉水使用時(shí)間微生物監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)。次從冷水閥放出的水為原始值。設(shè)兩個(gè)對(duì)照: 飲水機(jī)用兩個(gè)月不消毒處理裝上礦泉水后無使用, 飲水機(jī)消毒處理裝上礦泉水后無使用。跟蹤期定為1 、3 、5 天, 由冷水閥放水約40 0吐置滅菌瓶中送檢, 對(duì)照桶按同樣方法采樣送檢。結(jié)果顯示, 飲用1 天與3 天對(duì)比, 微生物指標(biāo)合格率從93 . 3%下降至6 0 .0%, 合格率有明顯差異, 飲用l 天與7 天對(duì)比, 微生物指標(biāo)合格率從93 . % 下降至36 . 7%, 合格率有顯著差異。說明飲用期確實(shí)存在細(xì)菌的二次污染。次放水時(shí), 都會(huì)通過透氣孔吸入空氣。據(jù)有關(guān)專家介紹, 即使在清潔的環(huán)境中, 每立方米的空氣中也有4 0 0 個(gè)細(xì)菌, 這些細(xì)菌隨著桶內(nèi)水的減少、空氣的增加而· 增多, 并隨著時(shí)間推移繁殖增生。